Влияние условий удаления криопротектора ДМСО на жизнеспособность и колониеобразующую активность криоконсервированных клеток эмбриональной печени человека

Авторы

  • N. G. Skorobogatova Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков
  • V. P. Grischuk Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков
  • A. Yu. Petrenko Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков

Аннотация

Изучено влиÑние различных уÑловий ÑƒÐ´Ð°Ð»ÐµÐ½Ð¸Ñ ÐºÑ€Ð¸Ð¾Ð¿Ñ€Ð¾Ñ‚ÐµÐºÑ‚Ð¾Ñ€Ð° ДМСО на жизнеÑпоÑобноÑÑ‚ÑŒ (ЖС) и колониеобразующую активноÑÑ‚ÑŒ Ñвежевыделенных и криоконÑервированных клеток Ñмбриональной печени (КЭП) человека 7-10 недель геÑтации. ИÑпользование раÑтвора ХенкÑа как Ñреды Ð¾Ñ‚Ð¼Ñ‹Ð²Ð°Ð½Ð¸Ñ (СО) приводит к Ñнижению общего количеÑтва и количеÑтва жизнеÑпоÑобных КЭП. Замена NaCl на Ñахарозу Ñнижает повреждающее дейÑтвие процедуры Ð¾Ñ‚Ð¼Ñ‹Ð²Ð°Ð½Ð¸Ñ ÐºÑ€Ð¸Ð¾Ð¿Ñ€Ð¾Ñ‚ÐµÐºÑ‚Ð¾Ñ€Ð°. При Ñтом медленное введение Ñахарозо-Ñолевого раÑтвора (ССР) позволÑет в большей Ñтепени Ñохранить ЖС клеток по Ñравнению Ñ Ð±Ñ‹Ñтрым ÑпоÑобом добавлениÑ. Оценку повреждающего дейÑÑ‚Ð²Ð¸Ñ Ñтапа ÑƒÐ´Ð°Ð»ÐµÐ½Ð¸Ñ Ð”ÐœÐ¡Ðž проводили 2 методами Ð¾ÐºÑ€Ð°ÑˆÐ¸Ð²Ð°Ð½Ð¸Ñ (трипановым Ñиним и бромиÑтым Ñтидием), ÑƒÑ‡Ð¸Ñ‚Ñ‹Ð²Ð°Ñ Ð¾Ð±Ñ‰ÐµÐµ количеÑтво клеток, ЖС  и выход жизнеÑпоÑобных клеток (ВЖК). Результаты, полученные при различных уÑловиÑÑ… ÑƒÐ´Ð°Ð»ÐµÐ½Ð¸Ñ ÐºÑ€Ð¸Ð¾Ð¿Ñ€Ð¾Ñ‚ÐµÐºÑ‚Ð¾Ñ€Ð°, не завиÑели от метода оценки и показали, что ВЖК ÑвлÑетÑÑ Ð½Ð°Ð¸Ð±Ð¾Ð»ÐµÐµ чувÑтвительным параметром жизнеÑпоÑобноÑти криоконÑервированных клеток. ÐšÐ¾Ð»Ð¾Ð½Ð¸ÐµÐ¾Ð±Ñ€Ð°Ð·ÑƒÑŽÑ‰Ð°Ñ Ð°ÐºÑ‚Ð¸Ð²Ð½Ð¾ÑÑ‚ÑŒ КЭП человека при культивировании в агаре на фидерном Ñлое, Ñодержащем лейкоциты здоровых взроÑлых доноров, поÑле криоконÑÐµÑ€Ð²Ð¸Ñ€Ð¾Ð²Ð°Ð½Ð¸Ñ Ð¸ медленного ÑƒÐ´Ð°Ð»ÐµÐ½Ð¸Ñ Ð”ÐœÐ¡Ðž Ñ Ð¿Ð¾Ð¼Ð¾Ñ‰ÑŒÑŽ ССР оÑтавалаÑÑŒ на уровне нативного контролÑ. Полученные результаты ÑвидетельÑтвуют о том, что ССР меньше повреждает КЭП человека на Ñтапе ÑƒÐ´Ð°Ð»ÐµÐ½Ð¸Ñ ÐºÑ€Ð¸Ð¾Ð¿Ñ€Ð¾Ñ‚ÐµÐºÑ‚Ð¾Ñ€Ð° ДМСО.

Загрузки

Опубликован

2002-12-25

Как цитировать

Skorobogatova, N. G., Grischuk, V. P., & Petrenko, A. Y. (2002). Влияние условий удаления криопротектора ДМСО на жизнеспособность и колониеобразующую активность криоконсервированных клеток эмбриональной печени человека. Проблемы криобиологии и криомедицины, (4), 16–23. извлечено от http://journal.cryo.org.ua/index.php/probl-cryobiol-cryomed/article/view/984

Выпуск

Раздел

Теоретическая и экспериментальная криобиология