Біотехнологічний потенціал мікроводоростей: методи зберігання та некріогенні чинники ефективності кріоконсервування

Автор(и)

  • Nadiia Chernobai Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України, м. Харків; Національний науковий центр «Інститут судових експертиз ім. Засл. проф. М.С. Бокаріуса» м. Харків https://orcid.org/0000-0002-5736-9277
  • Anton Gerilovych Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України, м. Харків; Приватна наукова установа «Науково-дослідний інститут єдиного здоров’я» м. Харків https://orcid.org/0000-0002-3280-4172
  • Nadiia Shevchenko Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України, м. Харків https://orcid.org/0000-0001-6794-1444

DOI:

https://doi.org/10.15407/cryo35.02.057

Ключові слова:

мікроводорості, біотехнологія, кріоконсервування, ліофілізація, культивування, адаптація

Анотація

В огляді розглянуто перспективи використання та методи збереження колекційних зразків мікроводоростей,які мають значний біотехнологічний потенціал у харчовій, фармацевтичній, екологічній та енергетичній галузях. У роботі проведено аналіз та узагальнено сучасні методи підтримання культур мікроводоростей з фокусом на їхню стабільність, збереження біологічних властивостей та можливості довгострокового зберігання. Дослідження охоплює порівняння різних підходів до збереження мікроводоростей, зокрема серійне субкультивування, ліофілізацію та кріоконсервування. Особливу увагу приділено кріоконсервуванню як ефективному методу довготривалого зберігання генетично стабільних культур, що дозволяє мінімізувати втрати цінних біотехнологічних характеристик. Визначено вплив стадії розвитку культури, концентрації клітин у суспензії, холодової адаптації, центрифугування на виживаність мікроводоростей після кріоконсервування. Отримані результати мають важливе значення для розвитку біотехнологічних та екологічних програм, пов’язаних з використанням мікроводоростей.

Probl Cryobiol Cryomed 2025; 35(2):57–68

Біографії авторів

Nadiia Chernobai, Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України, м. Харків; Національний науковий центр «Інститут судових експертиз ім. Засл. проф. М.С. Бокаріуса» м. Харків

Лабораторія фітокріобіології

Anton Gerilovych, Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України, м. Харків; Приватна наукова установа «Науково-дослідний інститут єдиного здоров’я» м. Харків

Лабораторія фітокріобіології

Nadiia Shevchenko, Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України, м. Харків

Лабораторія фітокріобіології

Посилання

Abate R, Oon YL, Oon YS, et al. Diverse interactions between bacteria and microalgae: A review for enhancing harmful algal bloom mitigation and biomass processing efficiency. Heliyon [Internet]. 2024 Sep 15 [cited 17.04.2025]; 10 (17): e36503. Available from: https://www.cell.com/heliyon/fulltext/S2405-8440(24)12534-0 CrossRef

Abinandan S, Subashchandrabose SR, Pannerselvan L, et al. Potential of acid-tolerant microalgae, Desmodesmus sp. MAS1 and Heterochlorella sp. MAS3, in heavy metal removal and biodiesel production at acidic pH. Bioresour Technol. 2019; 278: 9-16. CrossRef

Abinandan S, Subashchandrabose SR, Venkateswarlu K, et al. Acid-tolerant microalgae can withstand higher concentrations of invasive cadmium and produce sustainable biomass and biodiesel at pH 3.5. Bioresour Technol. 2019; 281: 469-73. CrossRef

Arguelles EDLR, Martinez-Goss MR. Diversity of Philippine photosynthetic euglenophytes and their potential biotechnological uses: a review. Int J Emerging Technol. 2019; 10(4): 24-31.

Balasubramaniam V, Gunasegavan RD, Mustar S, et al. Isolation of industrial important bioactive compounds from microalgae. Molecules [Internet]. 2021 Feb 10 [cited 18.04.2025]; 26(4): 943. Available from: https://www.mdpi.com/1420-3049/26/4/943 CrossRef

Bedard S, Roxborough E, O'Neill E, Mangal V. The biomolecules of Euglena gracilis: harnessing biology for natural solutions to future problems. Protist [Internet]. 2024 May 31 [cited 17.04.2025]; 175(4): 126044. Available from: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1434461024000361 CrossRef

Bortolini DG, Maciel GM, Fernandes IDAA, et al. Functional properties of bioactive compounds from Spirulina spp.: Current status and future trends. Food Chem Mol Sci [Internet]. 2022 Dec 30 [cited 13.03.2025]; 5: 100134. Available from: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S2666566222000624 CrossRef

Bui TV, Ross IL, Jakob G, Hankamer B. Impact of procedural steps and cryopreservation agents in the cryopreservation of chlorophyte microalgae. PLoS One [Internet]. 2013 Nov 11 [cited 12.03.2025]; 8(11): e78668. Available from: https://journals.plos.org/plosone/article?id=10.1371/journal.pone.0078668 CrossRef

Carvalho RH, Callegari MA, Dias CP, et al. Euglena gracilis β-glucans (1,3): enriching colostrum of sow for enhanced piglet immunity. Animals [Internet]. 2023 Nov 12 [cited 14.04.2025]; 13(22): 3490. Available from: https://www.mdpi.com/2076-2615/13/22/3490 CrossRef

Chen Z, Dong Y, Duan S, et al. A chromosome-level genome assembly for the paramylon-producing microalga Euglena gracilis. Sci Data [Internet]. 2024 July 16 [cited 15.04.2025]; 11(1): 780. Available from: https://www.nature.com/articles/s41597-024-03404-y CrossRef

Chernobai NA, Kadnikova NG, Vozovyk KD, et al. Temperature-salt stress increases yield of valuable metabolites and shelf life of microalgae. Biophys Bull. 2022; 48: 7-17. CrossRef

Čižkova M, Mezricky P, Mezricky D, et al. Bioaccumulation of rare earth elements from waste luminophores in the red algae, Galdieria phlegrea. Waste Biomass Valor. 2021; 12: 3137-46. CrossRef

Collins T, Margesin R. Psychrophilic lifestyles: mechanisms of adaptation and biotechnological tools. Appl Microbiol Biotechnol. 2019; 103(7): 2857-71. CrossRef

Corbett LL, Parker DL. Viability of lyophilized cyanobacteria (blue-green algae). Appl Environ Microbiol. 1976; 32(6): 777-80. CrossRef

Cvetkovska M. Algae use the underwater light spectrum to sense depth. Nature. 2025; 637(8046): 553-4. CrossRef

Dai JL, He YJ, Chen HH, Jiang JG. Dual roles of two malic enzymes in lipid biosynthesis and salt stress response in Dunaliella salina. JAFC. 2023; 71(45): 17067-79. CrossRef

Daily WA, McGuire JM. Preservation of some algal cultures by lyophilization. Butl Univ Bot Stud. 1954; 11(8/17): 139-43.

Day JG, Brand JJ. Cryopreservation methods for maintaining microalgal cultures. In: Andersen RA, editor. Algal culturing techniques. London: Elsevier Academic Press; 2005. p. 165-87. CrossRef

Day JG, Fleck RA. Cryo-injury in algae and the implications this has to the conservation of micro-algae. Microalgae Biotechnol. 2015;1(1):1-11. CrossRef

Day JG, Watanabe MM, Turner MF. Ex situ conservation of protistan and cyanobacterial biodiversity: CCAP-NIES collaboration 1991-1997. Phycol Res. 1998; 46(s2): 77-83. CrossRef

Dubey S, Chen CW, Haldar D, et al. Advancement in algal bioremediation for organic, inorganic, and emerging pollutants. Environ Pollut [Internet]. 2023 Jan 15 [cited 08.03.2025]; 317: 120840. Available from: https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S0269749122020553 CrossRef

Ermilova E. Cold stress response: an overview in Chlamydomonas. Front Plant Sci [Internet] Sep 03 [cited 28.02.2025]; 2020; 11: 569437. Available from: https://www.frontiersin.org/journals/plant-science/articles/10.3389/fpls.2020.569437/full CrossRef

Fernandez-Valenzuela S, Chavez-Ruvalcaba F, Beltran-Rocha JC, et al. Isolation and culturing axenic microalgae: mini-review. Open Microbiol J. 2021; 15(1): 111-9. CrossRef

Foo SC, Mok CY, Ho SY, Khong NM. Microalgal culture preservation: Progress, trends and future developments. Algal Res [Internet]. 2023 Feb 23 [cited 25.02.2025]; 71(1): 103007. Available from: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S2211926423000401 CrossRef

Foo SC, Lee ZS, Yap MKK, Tan JW. The antioxidant, wound healing properties and proteomic analysis of water extracts from the tropical cyanobacteria, Nostoc NIES-2111_MUM004. 3Biotech [Internet]. 2023 Feb 02 [cited 17.04.2025]; 13(2): 71. Available from: https://link.springer.com/article/10.1007/s13205-022-03448-0 CrossRef

Gan S, Liang S, Zou Q, Shang C. Optimization of carotenoid extraction of a halophilic microalgae. PloS One [Internet]. 2022 Aug 2 [cited 15.04.2024]; 17(8): e0270650. Available from: https://journals.plos.org/plosone/article?id=10.1371/journal.pone.0270650 CrossRef

Garrido-Cardenas JA, Han X, Alonso DL, Garcia-Maroto F. Evaluation and optimization of a methodology for the long-term cryogenic storage of Tetradesmus obliquus at -80 °C. Appl Microbiol Biotechnol. 2019; 103(5): 2381-90. CrossRef

Gharajeh HN, Valizadeh M, Dorani E, Hejazi MA. Biochemical profiling of three indigenous Dunaliella isolates with main focus on fatty acid composition towards potential biotechnological application. Biotechnol Rep [Internet]. 2020 June 2 [cited 11.03.2025]; 26: e00479. Available from: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S2215017X20301235 CrossRef

Hamlaoui S, Yéprémian C, Duval C, et al. The culture collection of cyanobacteria and microalgae at the French National Museum of Natural History: A century old but still alive and kicking! Including in memoriam: Professor Alain Couté. Cryptogamie, Algologie. 2022; 43: 41-83. CrossRef

Henchion M, Hayes M, Mullen AM, et al. Future protein supply and demand: Strategies and factors influencing a sustainable equilibrium. Foods [Internet]. 2017 July 20 [cited 13.03.2025]; 6: 53. Available from: https://www.mdpi.com/2304-8158/6/7/53 CrossRef

Hepburn C, Adlen E, Beddington J, et al. The technological and economic prospects for CO2 utilization and removal. Nature. 2019; 575(7781): 87-97. CrossRef

Holm-Hansen O. Viability of blue-green and green algae after freezing. Physiol Plant. 1963; 16(3): 530-40. CrossRef

Hosseini A, Shariati M. Dunaliella biotechnology: Methods and applications. J Appl Microbiol. 2009; 107: 14-35. CrossRef

Hosseinizand H, Sokhansanj S, Lim CJ. Studying the drying mechanism of microalgae Chlorella vulgaris and the optimum drying temperature to preserve quality characteristics. Dry Technol. 2017; 36(9): 1049-60. CrossRef

Hyrslova I, Krausova G, Mrvikova I, et al. Functional properties of Dunaliella salina and its positive effect on probiotics. Mar Drugs [Internet]. 2022 Dec 15 [cited 09.03.2025]; 20: 781. Available from: https://www.mdpi.com/1660-3397/20/12/781 CrossRef

Jang HK, Kang JJ, Lee JH, et al. Comparison of annual biosynthetic calorie productions by phytoplankton in different southern Korean bays. Frontiers in Marine Science [Internet]. 2024 July 29 [cited 13.03.2025]; 11: 1367137. Available from: https://www.frontiersin.org/journals/marine-science/articles/10.3389/fmars.2024.1367137/full CrossRef

Kihika JK, Wood SA, Rhodes L, et al. Cryoprotectant treatment tests on three morphologically diverse marine dinoflagellates and the cryopreservation of Breviolum sp. (Symbiodiniaceae). Sci Rep [Internet]. 2022 Jan 13 [cited 03.03.2025]; 12: 646. Available from: https://www.nature.com/articles/s41598-021-04227-2 CrossRef

Kugler A, Kumari P, Kokabi K, et al. Resilience to freezing in the vegetative cells of the microalga Lobosphaera incisa (Trebouxiophyceae, Chlorophyta). J Phycol. 2020; 56(2): 334-45. CrossRef

Lam W, Lee TC, Tam NF, et al. Bacteria associated with Karenia mikimotoi in modulating its ichthyotoxicity. Mar Pollut Bull [Internet]. 2025 July 1 [cited 16.04.2025]; 216: 117939. Available from: https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S0025326X2500414X CrossRef

Leão PN, Martins TP, Abt K, et al. Incorporation and modification of fatty acids in cyanobacterial natural products biosynthesis. Chem Comm. 2023; 59(30): 4436-46. CrossRef

Margesin R, Miteva V. Diversity and ecology of psychrophilic microorganisms. Res Microbiol. 2011; 162(3): 346-61. CrossRef

Marx JG, Carpenter SD, Deming JW. Production of cryoprotectant extracellular polysaccharide substances (EPS) by the marine psychrophilic bacterium Colwellia psychrerythraea strain 34H under extreme conditions. Can J Microbiol. 2009; 55(1): 63-72. CrossRef

Mazur P. Freezing of living cells: mechanisms and implications. Am J Physiol. 1984; 247(3): 125-42. CrossRef

Mock T. Algal model species for advancing biological sciences. J Phycol. 2023; 59(1): 1-3. CrossRef

Mokrosnop VM, Zolotareva EK. [Accumulation of α-tocopherol in microalgae cells]. Microbiol Biotechnol. 2021; (2): 6-26. Ukrainian. CrossRef

Morris GJ, Clarke A. The cryopreservation of Chlorella. 4. Accumulation of lipid as a protective factor. Arch Microbiol. 1978; 119(2): 153-6. CrossRef

Morris GJ, McGrath JJ. Intracellular ice nucleation and gas bubble formation in Spirogyra. Cryo Letters. 1981; 2: 341-52.

Morris GJ. Cryopreservation of 250 strains of Chlorococcales by the method of two-step cooling. Br Phycol J. 1978; 13(1): 15-24. CrossRef

Morris GJ. The cryopreservation of Chlorella. 2. Effect of growth temperature on freezing tolerance. Arch Microbiol. 1976; 107(3): 309-12. CrossRef

Morschett H, Tenhaef N, Hemmerich J, et al. Robotic integration enables autonomous operation of laboratory scale stirred tank bioreactors with model-driven process analysis. Biotechnol Bioeng. [Internet]. 2021 Apr 19 [cited 16.04.2025]; 118(7): 275969. Available from: https://analyticalsciencejournals.onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/bit.27795 CrossRef

Nagao M, Ozaki T, Fukuda H, et al. Alkane biosynthesis gene expression and its increased production in recombinant cyanobacteria. FEBS Open Bio. 2025; 15(6): 949-62. CrossRef

Ortiz-Martínez VM, Andreo-Martínez P, García-Martínez N, et al. Approach to biodiesel production from microalgae under supercritical conditions by the PRISMA method. Fuel Process Technol. 2019; 191: 211-22. CrossRef

Oslan SNH, Shoparwe NF, Yusoff AH, et al. A review on Haematococcus pluvialis bioprocess optimization of green and red stage culture conditions for the production of natural astaxanthin. Biomolecules [Internet]. 2021 Feb 10 [cited 13.03.2025]; 11(2): 256. Available from: https://www.mdpi.com/2218-273X/11/2/256 CrossRef

Piasecki BP, Diller KR, Brand JJ. Cryopreservation of Chlamydomonas reinhardtii: a cause of low viability at high cell density. Cryobiology. 2009; 58(1): 103-9. CrossRef

Prieto A, Pedro Canavate J, Garcia-Gonzalez M. Assessment of carotenoid production by Dunaliella salina in different culture systems and operation regimes. J Biotechnol. 2011; 151: 180-5. CrossRef

Prieto-Guevara M, Alarcon-Furnieles J, Jimenez-Velasquez C, et al. Cryopreservation of the microalgae Scenedesmus sp. Cells [Internet]. 2023 Feb 09 [cited 11.03.2025]; 12: 562. Available from: https://www.mdpi.com/2073-4409/12/4/562 CrossRef

Puente-Sanchez F, Macias-Perez LA, Campbell KL, et al. Bacterioplankton taxa compete for iron along the early spring-summer transition in the Arctic Ocean. Ecol Evol [Internet]. 2024 June 18 [cited 16.04.2025]; 14(6): e11546. Available from: https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1002/ece3.11546 CrossRef

Ramaraj S, Niran J. Modified medium for enhanced growth of Dunaliella strains. Int J Curr Sci. 2013; 5: 67-73.

Raymond JA, Morgan-Kiss R, Stahl-Rommel S. Glycerol is an osmoprotectant in two Antarctic Chlamydomonas species from an ice-covered saline lake and is synthesized by an unusual bidomain enzyme. Front Plant Sci [Internet]. 2020 Aug 20 [cited 13.02.2025]; 11: 1259. Available from: https://www.frontiersin.org/journals/plant-science/articles/10.3389/fpls.2020.01259/full CrossRef

Remias D, Prochazkova L, Nedbalova L, et al. Novel insights in cryptic diversity of snow and glacier ice algae communities combining 18S rRNA gene and ITS2 amplicon sequencing. FEMS Microbiol Ecol [Internet]. 2023 Dec 12 [cited 17.04.2025]; 99(12): 134. Available from: https://academic.oup.com/femsec/article/99/12/fi ad134/7330195 CrossRef

Rojas-Villalta D, Rojas-Rodriguez D, Villanueva-Ilama M, et al. Exploring extremotolerant and extremophilic microalgae: new frontiers in sustainable biotechnological applications. Biology [Internet]. 2024 Sep 11 [cited 04.03.2025]; 13(9): 712. Available from: https://www.mdpi.com/2079-7737/13/9/712 CrossRef

Schulze PSC, Hulatt ChJ, Morales-Sanchez D, et al. Fatty acids and proteins from marine cold adapted microalgae for biotechnology. Algal Res. [Internet]. 2019 Sep 6 [cited 13.03.2025]; 42: 101604. Available from: https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S22119264193012862 CrossRef

Song H, He M, Wu C, et al. Global transcriptomic analysis of an Arctic Chlorella-Arc reveals its eurythermal adaptivity mechanisms. Algal Res [Internet]. 2020 Jan 21 [cited 13.03.2025]; 46: 101792. Available from: https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S2211926419309427 CrossRef

Soru S, Malavasi V, Concas A, et al. A novel investigation of the growth and lipid production of the extremophile microalga Coccomyxa melkonianii SCCA 048 under the effect of different cultivation conditions: Experiments and modeling. Chem Eng J [Internet]. 2019 Dec 1 [cited 13.03.2025]; 377: 120589. Available from: https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S138589471832521X CrossRef

Stock W, Willems A, Mangelinckx S, et al. Selection constrains lottery assembly in the microbiomes of closely related diatom species. ISME Commun [Internet]. 2022 Feb 02 [cited 16.04.2025]; 2(1): 11. Available from: https://academic.oup.com/ismecommun/article/2/1/11/7461074 CrossRef

Taylor R, Fletcher RL. Cryopreservation of eukaryotic algae - a review of methodologies. J Appl Phycol. 1998; (10): 481-501. CrossRef

Tzovenis I, Triantaphyllidis G, Naihong X, et al. Cryopreservation of marine microalgae and potential toxicity of cryoprotectants to the primary steps of the aquacultural food chain. Aquaculture. 2004; 230(1-4): 457-73. CrossRef

Valledor L, Furuhashi T, Hanak AM, Weckwerth W. Systemic cold stress adaptation of Chlamydomonas reinhardtii. Mol Cell Proteomics. 2013; 12(8): 2032-47. CrossRef

Verspreet J, Schoeters F, Bastiaens L. The impact of non-concentrated storage on the centrifugation yield of Microchloropsis gaditana: a pilot-scale study. Life [Internet]. 2024 Jan 17 [cited 07.05.2025]; 14(1): 131. Available from: https://www.mdpi.com/2075-1729/14/1/131 CrossRef

Vozovyk K, Shevchenko N. [Effect of low temperature storage conditions on the viability of microalgae Chlorococcum dissectum]. The Journal of V.N. Karazin Kharkiv National University. Series «Biology». 2022; 39: 12-9. Ukrainian. CrossRef

Yaremich AV, Karamushka Vl, Kramarenko AO. Remote control of micro algae cultivation under conditions of growth medium regulation. Hydrobiological Journal. 2021; 57(1): 48-54. CrossRef

Zhang H, Yan Q, An Z, Wen Z. A revolving algae biofilm-based photosynthetic microbial fuel cell for simultaneous energy recovery, pollutants removal, and algae production. Front Microbiol [Internet]. 2022 Oct 12 [cited 17.04.2025]; 13: 990807. Available from: https://www.frontiersin.org/journals/microbiology/articles/10.3389/fmicb.2022.990807/full CrossRef

Zolotarova OK, Mykhailenko NF, Syvash OO, Shniukova YeI. [Prospects for the use of microalgae in biotechnology.] Kyiv: Alterpres; 2008. 234 p. Ukrainian.

Downloads

Опубліковано

2025-11-23

Як цитувати

Chernobai, N., Gerilovych, A., & Shevchenko, N. (2025). Біотехнологічний потенціал мікроводоростей: методи зберігання та некріогенні чинники ефективності кріоконсервування. Проблеми кріобіології і кріомедицини, 35(2), 57–67. https://doi.org/10.15407/cryo35.02.057

Номер

Розділ

Оглядові статті