Выбор условий витрификации макропористых матриц, заселенных мезенхимальными стромальными клетками

Авторы

  • Natalia Trufanova Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков
  • Igor Kovalenko Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков
  • Oleksandr Petrenko Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков

DOI:

https://doi.org/10.15407/cryo30.01.077

Ключевые слова:

тканеинженерные конструкции, макропористая матрица, витрификация, девитрификация, растрескивание, мезенхимальные стромальные клетки, жизнеспособность

Аннотация

В работе были определены состав раствора криопротекторов и условия витрификации (способы насыщения, удаления криопротекторов, режимы охлаждения-отогрева) тканеинженерных конструкций на основе макропористых матриц (МПМ) и мезенхимальных стромальных клеток (МСК), предупреждающих развитие кристаллизации и растрескивание стек-лообразной фазы, а также исследовано влияние разработанных условий на жизнеспособность клеток и структуру МПМ. Процессы кристаллизации и растрескивания изучали при охлаждении и отогреве МПМ в растворах криопротекторов в криопробирках. Жизнеспособность МСК в суспензии определяли по окрашиванию трипановым синим, в составе МПМ –по окрашиванию этидиум бромидом и флуоресцеин диацетатом. Метаболическую активность МСК оценивали по МТТ-тесту. Показано, что выбранные условия обеспечивают высокую жизнеспособность МСК после витрификации в виде суспензии, но требуют усовершенствования для сохранения клеток, заселенных в макропористые матрицы.

Probl Cryobiol Cryomed 2020; 30(1): 077–089

Биографии авторов

Natalia Trufanova , Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков

Отдел криобиохимии

Igor Kovalenko , Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков

Отдел низкотемпературного конÑервированиÑ

Oleksandr Petrenko, Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков

Отдел криобиохимии

Библиографические ссылки

Acker J, Larese A, Yang H, et al. Intracellular ice formation is affected by cell interactions. Cryobiology. 1999; 38(4): 363-71. CrossRef

Baudot A, Alger L, Boutron P. Glass-forming tendency in the system water-dimethyl sulfoxide. Cryobiology. 2000; 40(2): 151-8. CrossRef

Baudot A, Odagescu V. Thermal properties of ethylene glycol aqueous solutions. Cryobiology. 2004; 48(3): 283-94. CrossRef

Catry J, Luong-Nguyen M, Arakelian L, et al. Circumferential esophageal replacement by a tissue-engineered substitute using mesenchymal stem cells: an experimental study in mini pigs. Cell Transplant. 2017; 26(12): 1831-9. CrossRef

Chen D, Gelenter MD, Hong M, et al. Icephobic surfaces induced by interfacial nonfrozen water. ACS Appl Mater Interfaces. 2017; 9(4): 4202-14. CrossRef

Dankberg F, Persidsky MD. A test of granulocyte membrane integrity and phagocytic function. Cryobiology. 1976; 13(4): 430-2. CrossRef

Day AGE, Bhangra KS, Murray-Dunning C. The effect of hypothermic and cryogenic preservation on engineered neural tissue. Tissue Eng Part C Methods. 2017; 23(10): 575-82. CrossRef

Flaxman BA. Cell identification in primary cell cultures from skin. In vitro. 1974; 10(1-2): 112-8. CrossRef

Fritsch K, Pigeot S, Feng X, et al. Engineered humanized bone organs maintain human hematopoiesis in vivo. Exp Hematol. 2018; 61: 45-51. CrossRef

Irimia D, Karlsson J. Kinetics and mechanism of intercellular ice propagation in a micropatterned tissue construct. Biophys J. 2002; 82(4): 1858-68. CrossRef

Kravchenko LP, Petrenko AYu, Somov AYu, et al. Respiratory activity of isolated rat hepatocytes following cold storage and subsequent rewarming: A comparison of sucrose-based and University of Wisconsin solutions. Cryobiology. 2001; 42(3): 218-21. CrossRef

Kuleshova LL, MacFarlane DR, Trounson AO, et al. Sugars exert a major influence on the vitrification properties of ethylene glycol-based solutions and have low toxicity to embryos and oocytes. Cryobiology. 1999; 38(2): 119-30. CrossRef

Lawson A, Mukherjee IN, Sambanis A. Mathematical modeling of cryoprotectant addition and removal for the cryopreservation of engineered or natural tissues. Cryobiology. 2012; 64(1): 1-11. CrossRef

MacFarlane DR, Forsyth M, Barton CA. Vitriï¬cation and devitriï¬cation in cryopreservation. In: Steponkus PL, editor. Advances in Low-Temperature Biology. London: JAI Press; 1991, Vol. 1. p. 221-77.

Mehl PM. Nucleation and crystal growth in a vitriï¬ cation solution tested for organ cryopreservation by vitriï¬ cation. Cryobiology. 1993; 30(5): 509-18. CrossRef

Petrenko YA, Ivanov RV, Lozinsky VI, et al. Comparison of the methods for seeding human bone marrow mesenchymal stem cells to macroporous alginate cryogel carriers. Bull. Exp. Biol. Med. 2011; 150(4): 543-6. CrossRef

Petrenko YA, Ivanov RV, Petrenko AY, et al. Coupling of gelatin to inner surfaces of pore walls in spongy alginate-based scaffolds facilitates the adhesion, growth and differentiation of human bone marrow mesenchymal stromal cells. J Mater Sci Mater Med. 2011; 22(6): 1529-40. CrossRef

Riss T, Moravec RA, Niles AL, et al. Cell Viability Assays. In: Assay Guidance Manual [Internet]. 2013 May 1 [cited 2018 May 22]. Available from: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK144065/

Seglen PO. Preparation of isolated rat liver cells. Methods Cell Biol. 1976; 13: 29-83. CrossRef

Shaw JM, Kuleshova LL, MacFarlane DR, et al. Vitrification properties of solutions of ethylene glycol in saline containing PVP, Ficoll, or dextran. Cryobiology. 1997; 35(3): 219-29. CrossRef

Steif PS, Palastro M, Wen CR, et al. Cryomacroscopy of vitrification, Part II: Experimental observations and analysis of fracture formation in vitrified VS55 and DP6. Cell Preservation Technology. 2005; 3(3): 184-200. CrossRef

Trufanova NA, Zaikov VS, Zinchenko AV, et al. Closed vitrification system as a platform for cryopreservation of tissue engineered constructs. CryoLetters. 2016; 37(6): 440-7. PubMed

Wen F, Magalhães R, Gouk SS, et al. Vitreous cryopreservation of nanofibrous tissue-engineered constructs generated using mesenchymal stromal cells. Tissue Eng Part C Methods. 2009; 15(1): 105-14. CrossRef a>

Wowk B, Leitl E, Rash CM, et al. Vitrification enhancement by synthetic ice blocking agents. Cryobiology. 2000; 40(3): 228-36. CrossRef

Wowk B. Roles of ice-active agents in organ cryopreservation. Cryobiology. 2015; 71(1): 172-3. CrossRef

Wu Y, Yu H, Chang S, et al. Vitreous cryopreservation of cell-biomaterial constructs involving encapsulated hepatocytes. Tissue Eng. 2007; 13(3): 649-58. CrossRef

Загрузки

Опубликован

2020-03-28

Как цитировать

Trufanova , N., Kovalenko , I., & Petrenko, O. (2020). Выбор условий витрификации макропористых матриц, заселенных мезенхимальными стромальными клетками. Проблемы криобиологии и криомедицины, 30(1), 77–89. https://doi.org/10.15407/cryo30.01.077

Выпуск

Раздел

Криоконсервирование биологических систем