ÐффективноÑÑ‚ÑŒ Ñахарозо-Ñодержащего раÑтвора и раÑтвора UW Ð´Ð»Ñ Ð³Ð¸Ð¿Ð¾Ñ‚ÐµÑ€Ð¼Ð¸Ñ‡ÐµÑкого Ñ…Ñ€Ð°Ð½ÐµÐ½Ð¸Ñ Ð¼ÐµÐ·ÐµÐ½Ñ…Ð¸Ð¼Ð°Ð»ÑŒÐ½Ñ‹Ñ… Ñтромальных клеток человека в ÑуÑпензии или в ÑоÑтаве альгинатных микроÑфер
DOI:
https://doi.org/10.15407/cryo25.04.329Ключові слова:
мезенхімальні Ñтромальні клітини, альгінатні мікроÑфери, гіпотермічне зберіганнÑ, конÑервуючі розчини, культивуваннÑ, адгезіÑ, метаболічна активніÑÑ‚ÑŒ, індуковане диференціюваннÑАнотація
ДоÑліджували вплив гіпотермічного Ð·Ð±ÐµÑ€Ñ–Ð³Ð°Ð½Ð½Ñ (ГЗ) на життєздатніÑÑ‚ÑŒ та функціональну активніÑÑ‚ÑŒ мезенхімальних Ñтромальних клітин (МСК) людини в ÑуÑпензії та альгінатних мікроÑферах (ÐМС). Клітини зберігали в герметично закритих кріопробірках за 4°С у культуральному Ñередовищі (КС), ÑахарозовміÑному розчині (СВР) та розчині УніверÑитету Ð’Ñ–ÑконÑіну (UW). Через 3 Ñ– 7 діб Ð·Ð±ÐµÑ€Ñ–Ð³Ð°Ð½Ð½Ñ Ð¶Ð¸Ñ‚Ñ‚Ñ”Ð·Ð´Ð°Ñ‚Ð½Ñ–ÑÑ‚ÑŒ, метаболічну активніÑÑ‚ÑŒ та морфофункціональний Ñтан МСК оцінювали за МТТ-, Alamar Blue-теÑтами, адгезивною активніÑÑ‚ÑŽ, морфологією Ñ– здатніÑÑ‚ÑŽ до мультилінійного Ð´Ð¸Ñ„ÐµÑ€ÐµÐ½Ñ†Ñ–ÑŽÐ²Ð°Ð½Ð½Ñ Ð² умовах моношарового культивуваннÑ. Ð’Ñтановлено, що ГЗ ÑуÑпензії МСК у КС протÑгом 3-Ñ… діб призводить до 3–4-кратного Ð·Ð½Ð¸Ð¶ÐµÐ½Ð½Ñ Ñ—Ñ… життєздатноÑÑ‚Ñ– та здатноÑÑ‚Ñ– до адгезії. ІнкапÑулÑÑ†Ñ–Ñ Ð² ÐМС чаÑтково запобігає загибелі клітин. Гіпотермічне Ð·Ð±ÐµÑ€Ñ–Ð³Ð°Ð½Ð½Ñ Ð¿Ñ€Ð¾Ñ‚Ñгом 7 діб викликає загибель практично вÑÑ–Ñ… МСК Ñк у ÑуÑпензії, так Ñ– в ÐМС. Заміна КС на конÑервуючий розчин UW Ñ– СВРзапобігає зниженню життєздатноÑÑ‚Ñ– та метаболічної активноÑÑ‚Ñ– МСК при ГЗ протÑгом 3-Ñ… діб Ñк в ÑуÑпензії, так Ñ– Ñкладі ÐМС. ПіÑÐ»Ñ 7 діб ГЗ у розчині UW і СВРМСК у ÑуÑпензії та ÐМС зберігають життєздатніÑÑ‚ÑŒ на рівні 60–80%, адгезивні влаÑтивоÑÑ‚Ñ–, метаболічну активніÑÑ‚ÑŒ, а також здатніÑÑ‚ÑŒ до індукованого адіпо- та оÑтеогенного диференціюваннÑ. ВикориÑÑ‚Ð°Ð½Ð½Ñ ÐºÐ¾Ð½Ñервуючого розчину UW Ñ– СВРдозволÑÑ” подовжити термін гіпотермічного Ð·Ð±ÐµÑ€Ñ–Ð³Ð°Ð½Ð½Ñ ÐœÐ¡Ðš.
Посилання
Davis J., editor. Basic cell culture: a practical approach. Oxford, Oxford University Press; 2002.
Flaxman B. Cell identification in primary cell cultures from skin. In Vitro Cellular & Development Biology – Plant 1974; 10: 112–118. CrossRef
Nolan J.S., Packer L. Monolayer culture techniques for normal human diploid fibroblasts. Methods Enzymol 1974; 32(Part B): 561–568.
Petrenko A.Yu., Mazur S.P., Petrenko Yu.A. et al. Isolation and multilineage differentiation of stromal cells from human fetal and adult tissue. Transplantologiya 2007; 9(1): 218–220.
Petrenko A. Yu., Petrenko Yu. A., Skorobogatova N. G. et al. Stromal cells of bone marrow, adipose tissue and skin of the human during the expansion exhibit immunophenotype and differentiation potential of mesenchymal stem cells. Trans-plantologiya 2008; 10(1): 84–86.
Petrenko Yu. A., Skorobogatova N. G., Volkova N. A. et al. Characteristics of immunophenotype and differentiation potential of human mesenchymal bone marrow stromal cells after cryopreservation. Problems of Cryobiology 2010; 20(4): 436–442.
Pittenger M.F., Mackay A.M., Beck S.C. et al. Multilineage poten-tial of adult human mesenchymal stem cells. Science 1999; 248(5411): 143–147. CrossRef
Pravdyuk A. I., Petrenko Yu. A., Volkova N. A. et all. Properties of mesenchymal stromal human cells encapsulated in alginate microbeads. Biotechnologiya 2010; 3(2): 62–69.
Pravdyuk A.I., Petrenko Yu.A., Kholodnyy V.S. et al. Cryo-sensitivity of mesenchymal stromal cells encapsulated in alginate microbeads. Problems of Cryobiology 2010; 20(3): 235–245.
Semenchenko O.A., Kravchenko L.P., Shanyna I.V., Fuller B.D. Development of preserving solution for hypothermic storage of isolated organs. Transplantologiya 2004; 3: 197–199.
Shanina I., Kravchenko L. Metabolic properties of isolated rat hepatocytes after long-term storage at 4°C. Problems of Cryobiology 1997; (4): 66–68.
Skorobogatova N. G., Petrenko Yu. A., Volkova N. A. et al. The study of the capability to differentiation in osteogenic and adipogenic directions of human bone marrow mesenchymal stromal cells of clonal origin. Biotechnologiya 2010; 3(3): 72–77.
Somov A., Semenchenko O., Green C. et al. Mitochondrial function after liver preservation or low ionic-strenght solutions: a comparison between UW-based and sucrose-based solution. CryoLetters 2009; 30: 1–12.
Southard J.H., Belzer F.O. Organ preservation. Annu Rev Med 1995; 46: 235–247. CrossRef PubMed
Wahlberg J., Eklund T. Hollered comparison of energy meta-bolism in rat liver grafts during preservation in University of Wisconsin or Euro-Collins solution. Transplant Proceed 1995; 27: 721–722. PubMed
Zuk P.A., Zhu M., Ashjian P. et al. Human adipose tissue is a source of multipotent stem cells. Mol Biol Cell 2002; 13(12): 4279–4295. CrossRef PubMed
Downloads
Опубліковано
Як цитувати
Номер
Розділ
Ліцензія
Авторське право (c) 2020 Dmitriy N. Tarusin, Yuriy A. Petrenko, Olga A. Semenchenko, Vitaliy V. Mutsenko, Vedeney S. Zaikov, Aleksandr Yu. Petrenko
Ця робота ліцензується відповідно до Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Автори, які публікуються у цьому журналі, погоджуються з наступними умовами:
- Автори залишають за собою право на авторство своєї роботи та передають журналу право першої публікації цієї роботи на умовах ліцензії Creative Commons Attribution License, котра дозволяє іншим особам вільно розповсюджувати опубліковану роботу з обов'язковим посиланням на авторів оригінальної роботи та першу публікацію роботи у цьому журналі.
- Автори мають право укладати самостійні додаткові угоди щодо неексклюзивного розповсюдження роботи у тому вигляді, в якому вона була опублікована цим журналом (наприклад, розміщувати роботу в електронному сховищі установи або публікувати у складі монографії), за умови збереження посилання на першу публікацію роботи у цьому журналі.
- Політика журналу дозволяє і заохочує розміщення авторами в мережі Інтернет (наприклад, у сховищах установ або на особистих веб-сайтах) рукопису роботи, як до подання цього рукопису до редакції, так і під час його редакційного опрацювання, оскільки це сприяє виникненню продуктивної наукової дискусії та позитивно позначається на оперативності та динаміці цитування опублікованої роботи (див. The Effect of Open Access).
